Caractérisation, purification et détermination de la structure partielle d'une bactériocine produite par la souche Lacfococcuus lactis CI6

Résumé

La production de la bactériocine CI6 en milieu Elliker à 30°C, par la souche Lactococcus lactis C16 isolée du lait est effective après cinq heures de culture. La production volumétrique maximale est atteinte en 10 h. Cette bactériocine a un spectre d'action étroit vis-à-vis des bactéries lactiques. Les souches de lactococcus sont les plus sensibles à son action (17 inhibées sur 22 testées). Elle agit aussi sur Bacillus, quelques Clostridium. et une souche de Listeria parmi les trois testées. La bactériocine C16 est sensible à plusieurs protéases. À pH acide, elle résiste à 70°C pendant 20 min et perd 50% de son activité après un cycle d'autoclavage (15min à 120°C). La bactériocine C16 a été purifiée par une méthode simple et rapide, en deux étapes: son adsorption puis sa désorption des cellules productrices, en fonction du pH et de la force ionique, suivie d'une chromatographie liquide haute performance en phase inverse. La spectrophotométrie de masse indique, pour la bactériocine purifiée, un poids moléculaire de 8,280 kD. La composition en acides aminés, de la protéine montre la prédominance de la glycine, des acides aminés hydrophobes notamment l'alanine et les acides aminés basiques (Lys et Arg). Le microséquençage de la proteine N-terminale a permis d'identifier 15 acides aminés.